เทคโนโลยีการย่อยเนื้อเยื่อด้วยเอนไซม์ - ตั้งแต่คอลลาเจนดิบไปจนถึงผลิตภัณฑ์การย่อยที่มีความบริสุทธิ์สูง

November 05, 2024

คอลลาเจนเนสซึ่งมักใช้ในการย่อยเนื้อเยื่อของเอนไซม์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งการย่อยสลายคอลลาเจนนอกเซลล์ โดยแยกเครือข่ายของคอลลาเจนและไฟโบเนคตินออกโดยไม่ทำลายความสมบูรณ์ของโครงสร้างผิวเซลล์ เนื่องจากองค์ประกอบที่ซับซ้อนของเมทริกซ์นอกเซลล์ นอกจากคอลลาเจนแล้ว ยังมีโครงสร้างโมเลกุลขนาดใหญ่อื่นๆ เช่น อีลาสตินและไกลโคโปรตีน ยิ่งไปกว่านั้น ประเภทเนื้อเยื่อที่แตกต่างกัน แหล่งที่มาของสายพันธุ์ที่แตกต่างกัน และกลุ่มอายุที่แตกต่างกันก็มีส่วนประกอบของเมทริกซ์นอกเซลล์ที่แตกต่างกัน ดังนั้นผลิตภัณฑ์คอลลาเจนเนสในเชิงพาณิชย์โดยทั่วไปจึงเป็นสารสกัดหยาบของ Clostridium lysate lysate ซึ่งเป็นส่วนผสมของเอนไซม์โปรตีโอไลติก เช่น คอลลาเจนเนสและทริปซิน ซึ่งสามารถย่อยสลายคอลลาเจนและโปรตีนอื่นๆ และสารโมเลกุลขนาดใหญ่นอกเซลล์ เช่น โพลีแซ็กคาไรด์ การใช้งานย่อยอาหารในเนื้อเยื่อต่างๆ

อย่างไรก็ตาม สำหรับเนื้อเยื่อจำเพาะที่แยกได้จากการศึกษาทดลองต่างๆ จำเป็นต้องเลือกผลิตภัณฑ์คอลลาเจนเนสที่เหมาะสมตามประสบการณ์ และสำรวจความเข้มข้นของเอนไซม์ ปริมาตรของเอนไซม์ และเวลาออกฤทธิ์ของเอนไซม์ เพื่อหารูปแบบการย่อยที่ดีที่สุด

ตัวอย่างการเลือกผลิตภัณฑ์ Roche Collagenase

ผลิตภัณฑ์ Roche Collagenase สกัดจาก Clostridium histolyticum และจำแนกเป็น Collagenase A/B/D/P/H ตามกิจกรรมของเอนไซม์ต่างๆ และการใช้งานที่ได้รับการตรวจสอบแล้ว มีการใช้กันอย่างแพร่หลายในการแยกเซลล์เดี่ยวในเนื้อเยื่อต่างๆ เช่น ปอด หัวใจ กล้ามเนื้อ กระดูก เนื้อเยื่อไขมัน ตับ ไต กระดูกอ่อน เต้านม รก หลอดเลือด เนื้อเยื่อสมอง และเนื้อเยื่อเนื้องอก ผลผลิตของเซลล์ กิจกรรม และการทำงานของเซลล์ที่ได้รับจากแอปพลิเคชันจะต้องได้รับการควบคุมและตรวจสอบคุณภาพผลิตภัณฑ์อย่างเข้มงวด

การจำแนกประเภทโรชคอลลาเจนเนส	ส่วนประกอบของเอนไซม์หลัก	การใช้งานระดับองค์กรที่แนะนำ (ขึ้นอยู่กับการอ้างอิงผลิตภัณฑ์ในเอกสาร)
คอลลาเจนเนสเอ	คอลลาลาจีเนสประเภท 1, คอลลาเจนเนสประเภท 2, โคลสตริเพน, ทริปซิน, โปรตีเอสที่เป็นกลาง อัตราการผสมเอนไซม์ธรรมดา กิจกรรมของเอนไซม์ปานกลาง	โอโอไซต์ เซลล์ปอด
คอลลาเจนเนสบี	คอลลาลาจีเนสประเภท 1, คอลลาเจนเนสประเภท 2, โคลสตริเพน, ทริปซิน, โปรตีเอสที่เป็นกลาง กิจกรรมของคอลลาเจนเนสปานกลางถึงสูง กิจกรรมของโปรตีนคลอสตริเดียมที่สูงขึ้น (>10U/มก.)	คาร์ดิโอไมโอไซต์ คอนโดรไซต์ เซลล์สารตั้งต้นของตัวอ่อน
คอลลาเจนเนส ดี	คอลลาลาจีเนสประเภท 1, คอลลาเจนเนสประเภท 2, โคลสตริเพน, ทริปซิน, โปรตีเอสที่เป็นกลาง กิจกรรมของคอลลาเจนเนสปานกลางถึงสูง กิจกรรมทริปซินต่ำมาก (<0.2U/มก.)	ลิมโฟไซต์ เซลล์เดนไดรติก
คอลลาเจนเนส พี	คอลลาเจนที่ออกฤทธิ์สูง, คลอสตริดิน, ทริปซิน, โปรตีเอสที่เป็นกลาง ผลิตภัณฑ์ที่ได้รับการรับรองสำหรับการแยกเซลล์ไอส์เลต	เซลล์ไอส์เลต คอนโดรไซต์ ทีเซลล์
คอลลาเจนเนส เอช	คอลลาลาจีเนสประเภท 1, คอลลาเจนเนสประเภท 2, โคลสตริเพน, ทริปซิน, โปรตีเอสที่เป็นกลาง ผลิตภัณฑ์ที่ได้รับการรับรองสำหรับการแยกเซลล์ตับ	เซลล์ตับ ไฟโบรบลาสต์ อ้วน

เคล็ดลับ:

หากเนื้อเยื่อของคุณอยู่ในกระบวนการย่อยและกระจายตัวของเอนไซม์ เซลล์ยึดเกาะที่เป็นวุ้นจะปรากฏขึ้น ซึ่งส่งผลต่อการกระจายตัวของเซลล์ อาจเกิดจากการยึดเกาะของ DNA ที่ปล่อยออกสู่พื้นที่นอกเซลล์ในเซลล์ที่แตกสลาย การยึดเกาะของเซลล์สามารถทำได้โดยการเติม DNase การกระจายตัวที่ดีขึ้น

เนื่องจากเอนไซม์หยาบของคอลลาเจนเนสยังมีโปรตีเอสหลายชนิด เช่น อะไมเลสและไลเปส จึงย่อยโปรตีนบนผิวเซลล์ด้วย ทำให้เกิดความเสียหายต่อเซลล์ นอกจากนี้คอลลาจีเนสที่หยาบไม่ได้รักษาคุณภาพและกิจกรรมของเอนไซม์ที่สม่ำเสมอในแต่ละแบตช์ แม้ว่าคุณจะใช้คอลลาจีเนสในปริมาณที่แตกต่างกันสำหรับการย่อยในเนื้อเยื่อเดียวกัน คุณยังคงต้องปรับความเข้มข้นของเอนไซม์ ปริมาตรของเอนไซม์ และเวลาออกฤทธิ์ของเอนไซม์ให้เหมาะสม

แล้วคุณจะทำให้องค์กรของคุณแยกแยะการทดลองโดยใช้ความพยายามน้อยลงได้อย่างไร

ผลิตภัณฑ์ โรช ^Dispase®

Roche Dispase ^® สามารถใช้ในการเตรียมเซลล์ปฐมภูมิในเนื้อเยื่อและอวัยวะต่างๆ เนื่องจากมีลักษณะไม่รุนแรง จึงอาจทำให้เซลล์เสียหายได้น้อยที่สุดในระหว่างการย่อยอาหาร นอกจากนี้ยังสามารถใช้สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ย่อยและการแขวนลอยของเซลล์ การจับกลุ่มในของเหลวจะย่อยและดีพอลิเมอร์ Dispase ^® เป็นโปรตีเอสเป็นกลางบริสุทธิ์ที่สกัดจาก Bacillus polymyxa เพื่อขจัดความเป็นไปได้ของการปนเปื้อนของมัยโคพลาสมา และมีความคงตัวที่ดีภายใต้สภาวะ pH และอุณหภูมิที่หลากหลาย ดังนั้นจึงอยู่ในกระบวนการย่อยเนื้อเยื่อ ประสิทธิภาพมีเสถียรภาพมากกว่าคอลลาเจนเนส

Dispase ^® Roche การแยกเฉพาะในผิวหนังชั้นนอกและเซลล์ผิวหนังเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเยื่อหุ้มสมองที่ได้รับในการใช้งานที่หลากหลาย ความแตกต่างระหว่าง Dispase ^® I และ Dispase ^® II คือความแตกต่างในด้านความบริสุทธิ์ Dispase ^® I ได้รับการฆ่าเชื้อด้วยตัวกรอง และความบริสุทธิ์และกิจกรรมของเอนไซม์ต่อมิลลิกรัมของ Dispase ^® I นั้นสูงกว่า Dispase ^® II มาก

Roche High Purity Research Level Enzyme Mix Liberase Research Grade เอนไซม์ผสม

Liberase Research Grade Enzyme Blends ประกอบด้วยชุดของเอนไซม์ผสมซึ่งประกอบด้วยส่วนผสมของอัตราส่วนที่แตกต่างกันของโปรตีเอสที่เป็นกลาง (โปรตีเอสที่ไม่ใช่คลอสตริเดียม) และ Collagenase I + Collagenase II ที่มีความบริสุทธิ์สูง ในการใช้งานส่วนใหญ่ Liberase จะเข้ามาแทนที่คอลลาเจนเนสแบบเดิมและเพิ่มผลผลิตของเซลล์ ความมีชีวิตของเซลล์ และการทำงานของเซลล์

ภายใต้เงื่อนไขการหมักและการทำให้บริสุทธิ์ของเอนไซม์ที่เข้มงวด Liberase Research Grade Enzyme Blends จะกำจัดเอนไซม์ เช่น Clostridin และ trypsin โดยกำจัดเอนโดทอกซินและส่วนประกอบของเซลล์ที่ตายแล้ว >98% ออกจากวัตถุดิบ ซึ่งมีส่วนช่วยต่อองค์กร ในระหว่างกระบวนการย่อยอาหาร ความมีชีวิตของเซลล์จะเพิ่มขึ้นอย่างมาก ซีรีส์ Liberase ได้รับการฆ่าเชื้อด้วยตัวกรองและมีความสม่ำเสมอแบบแบทช์ต่อแบทช์ ทำให้มั่นใจในคุณภาพการย่อยและความสามารถในการทำซ้ำตลอดระยะการทดลอง

ผลิตภัณฑ์ลิเบอเรส	ปริมาณคอลลาเจนเนส (มก./หลอด)	กิจกรรมคอลลาเจนเนส (Wünschunits/หลอด)	ปริมาณโปรตีเอสที่เป็นกลาง	โปรตีเอสที่เป็นกลางออกฤทธิ์ต่อกิจกรรมของเอนไซม์ในเนื้อเยื่อ	ประเภทโปรตีเอสเป็นกลาง	เอนโดท็อกซิน (สหภาพยุโรป/มก.)
ลิเบอเรส DL	5มก 50มก	26 260	ต่ำ	+	กำจัด	≤50
ลิเบอเรส ดีเอช	5มก 50มก	26 260	สูง	+++	กำจัด	≤50
Liberase TL	5มก 50มก	26 260	ต่ำ	++	เทอร์โมไลซิน	≤50
ลิเบอเรส TM	5มก 50มก	26 260	ปานกลาง	++++	เทอร์โมไลซิน	≤50
ลิเบอเรส TH	5มก 50มก	26 260	สูง	+++++	เทอร์โมไลซิน	≤50

เปรียบเทียบผลิตภัณฑ์ทดแทนผลิตภัณฑ์ Roche Collagenase และ Liberase Series

โรช คอลลาเจนเนส	ลักษณะเฉพาะ	วึนชูนิต/มก	ผลิตภัณฑ์ Liberase ที่ใช้งานอยู่ที่สอดคล้องกัน
คอลลาเจนเนสเอ	ส่วนผสมของเอนไซม์ดิบ	0.15	ลิเบอเรส TM
คอลลาเจนเนสบี	ส่วนผสมของเอนไซม์ดิบ	0.15	ลิเบอเรส TH
คอลลาเจนเนส ดี	ส่วนผสมของเอนไซม์ดิบ	0.15	ลิเบอเรส TM
คอลลาเจนเนส พี	ส่วนผสมของเอนไซม์ดิบ	1.50	Liberase TL, Liberase DL
คอลลาเจนเนส เอช	ส่วนผสมของเอนไซม์ดิบ	0.15	ลิเบอเรส TM

เคล็ดลับ:

1. ผลิตภัณฑ์ซีรีส์ Liberase แบ่งออกเป็นผลิตภัณฑ์ห้าประเภทที่มีกิจกรรมการย่อยอาหารที่แตกต่างกันตามอัตราส่วนที่แตกต่างกันของคอลลาเจนเนสและโปรตีเอสที่เป็นกลาง คุณสามารถอ้างอิงถึงการศึกษาในห้องปฏิบัติการอื่นๆ หรือเอกสารตีพิมพ์สำหรับการเลือกผลิตภัณฑ์ที่เหมาะสมและการอ้างอิงถึงขั้นตอนการปฏิบัติงาน

http://?id=col_030100

2. สำหรับความพยายามในการย่อยเซลล์เนื้อเยื่อครั้งใหม่ ขอแนะนำให้เริ่มการทดลองกับ LiberaseTM ซึ่งมีความหลากหลายที่ดีสำหรับเนื้อเยื่อต่างๆ

3. ความบริสุทธิ์ของ Collagenase I + II ใน Liberase นั้นสูงมาก และโดยปกติเวลาในการฟักตัวจะลดลง 10 – 30% เมื่อเทียบกับการทดลองย่อยคอลลาเจนเนสทั่วไป

โปรดทราบ: ผลิตภัณฑ์เกรดการวิจัย Liberase และผลิตภัณฑ์เอนไซม์ย่อยอาหารอื่นๆ มีไว้สำหรับการวิจัยด้านวิทยาศาสตร์ชีวภาพและการวิจัยในหลอดทดลองเท่านั้น ห้ามใช้ผลิตภัณฑ์นี้สำหรับขั้นตอนทางคลินิกและการวินิจฉัย (เช่น การปลูกถ่ายเกาะเล็กเกาะน้อยของมนุษย์)

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับผลิตภัณฑ์ Liberase โปรด คลิกเพื่อดาวน์โหลดคู่มือ

ก่อนหน้านี้

Contal US

ผู้เขียน:

Mr. LI

อีเมล:

liyg@shuyang.com

Phone/WhatsApp:

+86 18608037281

ผลิตภัณฑ์ยอดนิยม

ข่าวบริษัท